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产品概述
本试剂盒为1管式高效反转录试剂盒。本试剂盒可在一步操作反应下同时完成基因组去除与逆转录,减少了操作步骤的同时还降低了复杂加样过程造成的样品污染与RNA降解的风险。优化的体系不仅延续了上代产品合成能力强、灵敏度高的优点,同时还针对低表达量及高GC含量的基因进行了优化,并且广泛适用于动植物及微生物RNA的逆转录反应,产物兼容染料法和探针法qPCR。
产品特点&优势
—操作简便:步骤简化,只需加入RNA,一步法即可完成基因组去除与逆转录;
—快速反应:50℃ 5 min可得到高质量cDNA;
—扩增效率高:本产品可兼顾低表达和高GC含量基因的扩增,CT值良好;
产品组成
操作流程
1. 反应体系配制
*1.基因表达量低时可增加RNA用量,但不建议超过5µg用量。
2. 用移液器轻柔吹打混匀。
反应程序
*1:对于富含复杂结构和高GC的模板,可适当延长反转录时间(10-15min),有助于提高反转录效率。
注:逆转录产物可立即用于qPCR反应,或于-30~-15°C保存,并在半年内使用;长期存放建议分装后于-85~-65°C保存,应避免cDNA反复冻融。
产品效果
1.逆转录效率测试
选取293T细胞提取RNA,将RNA浓度10倍梯度稀释,最低模板浓度梯度为10pg,分别用YoungGen#RT203和Supplier V产品逆转录,采用内参基因(β-actin)进行后续qPCR实验,实验结果如上图所示。
保存条件
-30~-15℃保存,干冰/-20℃运输。
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